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          技術(shù)文章

          移液工作中的小tips

          技術(shù)文章

          一、移液前準(zhǔn)備

          1. 移液器選擇

            • 根據(jù)移液量的范圍選擇合適量程的移液器,一般移液量應(yīng)在移液器量程的 10% - 100%之間,以確保移液準(zhǔn)確性。例如,移取 20 - 200μL 液體,選擇 200μL 量程的移液器較為合適。

            • 考慮液體的性質(zhì)(如黏度、揮發(fā)性、腐蝕性等)選擇相應(yīng)類型的移液器。對于高黏度液體(如甘油),建議使用外置活塞式移液器;對于腐蝕性液體(如強(qiáng)酸強(qiáng)堿),需使用耐腐蝕材質(zhì)的移液器。

          2. 移液器校準(zhǔn)與維護(hù)

            • 定期對移液器進(jìn)行校準(zhǔn),一般建議每 3 - 6 個月校準(zhǔn)一次,或在移液器經(jīng)過碰撞、跌落等可能影響精度的情況后及時校準(zhǔn),確保移液量的準(zhǔn)確性。

            • 使用前后檢查移液器的密封性,可通過觀察活塞運動是否順暢、吸頭連接是否緊密等方法判斷。如發(fā)現(xiàn)密封不良,及時進(jìn)行維修或更換部件。

          3. 吸頭選擇與安裝

            • 根據(jù)移液器和移液量的要求選擇合適規(guī)格的吸頭,確保吸頭與移液器匹配良好。吸頭的材質(zhì)應(yīng)符合實驗要求,如對于生物樣本,建議使用無熱原、無 DNA/RNA 酶的吸頭。

            • 安裝吸頭時,要確保吸頭與移液器連接緊密,無松動。可將移液器垂直插入吸頭,然后輕輕按壓或旋轉(zhuǎn)(根據(jù)移液器類型),聽到“咔嗒"聲表示安裝到位。

          二、移液操作過程

          1. 吸液技巧

            • 垂直吸液:吸液時移液器應(yīng)保持垂直,與液面保持適當(dāng)角度(一般不超過 20°),以確保吸液的準(zhǔn)確性和一致性。

            • 預(yù)潤洗:對于高精度移液或黏性液體,建議進(jìn)行預(yù)潤洗。即先將吸頭浸入液體中,吸取液體并排出,重復(fù) 2 - 3 次,使吸頭內(nèi)壁充分濕潤,減少液體殘留對移液量的影響。

            • 浸入深度:根據(jù)液體體積和容器類型調(diào)整吸頭浸入液體的深度。一般來說,移取小體積液體時,吸頭浸入深度約為 1 - 2mm;移取大體積液體時,浸入深度可適當(dāng)增加,但不宜過深,以免吸入過多液體或引起液體飛濺。

            • 緩慢吸液:吸液時要緩慢、平穩(wěn)地按下移液器按鈕,避免過快導(dǎo)致液體吸入過快,產(chǎn)生氣泡或使吸液量不準(zhǔn)確。當(dāng)液體吸入吸頭后,稍作停頓,確保液體全部進(jìn)入吸頭。

          2. 排液技巧

            • 排液位置:排液時,吸頭應(yīng)緊貼容器內(nèi)壁,以實現(xiàn)液體的全部排出。對于微量移液,可將吸頭尖靠在容器內(nèi)壁的較低位置,使液體沿內(nèi)壁流下,減少殘留。

            • 分步排液:對于較大體積的液體移取,可采用分步排液的方法。先按下移液器按鈕至第一停點,排出大部分液體,然后短暫停頓,再按下至第二停點,排出剩余液體,確保液體排盡。

            • 避免氣泡:排液過程中要避免產(chǎn)生氣泡,可通過緩慢排液、使吸頭與容器內(nèi)壁充分接觸等方法減少氣泡的產(chǎn)生。如果出現(xiàn)氣泡,可將吸頭重新浸入液體中,緩慢排液,將氣泡排出。

          三、移液后處理

          1. 吸頭棄置

            • 使用一次性吸頭時,移液完畢后應(yīng)及時將吸頭棄置于專用的吸頭盒或廢物容器中,避免吸頭殘留的液體污染環(huán)境或影響后續(xù)實驗。

            • 對于可重復(fù)使用的吸頭,使用后要進(jìn)行清洗和消毒,清洗時要全部去除吸頭內(nèi)壁的液體殘留和雜質(zhì),消毒可根據(jù)實驗要求選擇合適的方法(如高溫高壓滅菌、化學(xué)消毒等)。

          2. 移液器清潔與保養(yǎng)

            • 移液完畢后,用干凈的軟布或紙巾擦拭移液器外部,去除液體殘留和污漬。對于吸頭連接部位,要特別注意清潔,防止液體殘留影響下次使用。

            • 定期對移液器內(nèi)部進(jìn)行清潔和保養(yǎng),可使用移液器專用的清潔液或按照廠家推薦的清潔方法進(jìn)行操作。清潔后要確保移液器內(nèi)部全干燥,避免水分對移液器內(nèi)部部件造成腐蝕。

          3. 記錄與追溯

            • 在移液工作中,建議記錄移液的相關(guān)信息,如移液量、移液時間、移液器型號、吸頭規(guī)格等,以便在實驗出現(xiàn)問題時進(jìn)行追溯和分析。

            • 對于重要的實驗,可對移液器進(jìn)行使用記錄和校準(zhǔn)記錄的保存,確保移液過程的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。


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